1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
课题意义镉是最重要的重金属污染物之一,毒性强,在肾脏,肝脏和骨骼中积累,导致各种慢性疾病。
因此,镉已经吸引了大量的研究。
镉诱导的损伤机制非常复杂和不清楚。
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2. 研究的基本内容和问题
1:寻找到野生型序列。
2:探讨低浓度镉是否可以增加鲤鱼线粒体异质性,特别是在肝脏和肾脏是主要的解毒器官和影响镉的积累,是否会导致线粒体异质性大量增加。
3:探讨不同利于组织的线粒体异质性是否有差异。
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3. 研究的方法与方案
研究方案:研究方案分为分为六步:1:重金属积累实验;2:获取DNA提取样品;3:基因组DNA提取;4:D-loop序列扩增;5:克隆测序;6:序列分析。
可行性分析为了研究低浓度镉对鲤鱼线粒体的影响,用0.05mg/L的硫酸镉饲养鲤鱼两个月,每个对照组和实验组分别随机选取5条鲤鱼测定其肌肉组织,肝脏,肾脏中镉的含量。
然后将对照组和实验组三个组织线粒体D-loop扩增,克隆测序,进行异质性差异的比较,探索鲤鱼对污染物耐受的生理机制。
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4. 研究创新点
由于线粒体D环区中没有转录产物,所以变异容易积累。
在以前的群体遗传和系统发育研究中,经常选择线粒体D环区作为研究对象。
本研究中我们也选择该区域作为研究对象。
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5. 研究计划与进展
实施计划:1、2016.10于中国水产科学研究院淡水渔业研究中心渔场收集鲤鱼幼鱼运送到实验室驯化一周。
2、2016.10-12将它们置于玻璃水箱中饲养并分为两组:实验组加0.05mg / L镉,对照组不加镉。
实验用水使用前曝气三天,并且每天更换以维持水中镉离子的浓度基本不变。
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