1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
(一)课题意义:研究植物的滞绿机理在农业生产上有重要作用,植物滞绿突变体已广泛应用于一些基础研究和生产实践。
高等植物由于叶片和果实中含有大量叶绿素而呈现绿色,随着叶片衰老和果实成熟,叶片和果实内的叶绿素逐渐被分解,叶片和果实逐渐变成黄色。
然而,自然界中有些植株在衰老过程中叶绿素不能降解或者降解不明显,特别是在植株生育末期,叶片较长时间内保持绿色,这种衰老时叶片或果实依然保持绿色的现象称为滞绿[1]。
2. 研究的基本内容和问题
(一)研究目标:探究在逆境胁迫条件下黑麦草叶绿素代谢过程中NOL基因和ROS的相关性。
(二)研究内容:1.观察记录抑制NOL基因后的黑麦草植株在热处理下的生理变化。
2.观察记录抑制NOL基因后的黑麦草植株在热处理下ROS的变化。
3. 研究的方法与方案
(一)研究方法: 1.实验材料的准备:将特异性同源双链RNA(dsRNA)导入细胞内使目标基因NOL的表达量下降,获得转基因后的黑麦草株系后将其扩繁以得到实验材料。
2.利用逆境观察分析NOL基因表达量与ROS产量的相关性。
将获得的实验材料分别在38℃下分别处理2天,4天,6天,8天,另设在正常温度下的一组对照组。
4. 研究创新点
近年来,人们对叶绿素降解的认识无论是在降解产物的结构分析, 还是相关酶与调控蛋白的编码基因方面都取得了长足进展。
研究水稻等植物滞绿机理的文章也频频出现,而对于黑麦草的滞绿还未有许多研究。
对于NOL基因的研究也多以水稻为供体材料。
5. 研究计划与进展
(1)2016.8查阅并参考相关文献,撰写文献综述,初拟实验方案。
(2)2016.9-2017.1通过前期获得的敲除NOL基因的黑麦草株系扩繁得到实验材料。
(4)2017.1-2017.3对得到的黑麦草样本进行热处理观察其表型及ROS产量的变化。
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