用IEC和CIEF法检测单克隆抗体电荷异质性开题报告

 2022-12-27 11:30:45

1. 研究目的与意义

由于单克隆抗体是复杂的四聚体糖蛋白,而蛋白质修饰或结构的微小变化导致的蛋白表面电荷分布不均一性称为电荷异质性,通过以IEC和CIEF法来对单克隆抗体表面电荷异质性进行研究、对比和分析,能够深入的对氨基酸、多肽、蛋白质、酶类和抗体等的分离分析,对人类生命科学领域发挥了巨大的作用。

2. 文献综述

用IEC和CIEF法检测单克隆抗体电荷异质性单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。

通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。

用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备针对一种抗原表位的特异性抗体即单克隆抗体。

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3. 设计方案和技术路线

首先,介绍什么是单克隆抗体;其次,介绍什么是电荷异质性;然后,举例说明检测电荷异质性的方法有哪些;最后,对具体的方法进行对比和分析(以离子交换色谱法IEC和毛细管等电聚焦电泳法CIEF为例)。

4. 工作计划

正在研究和分析离子交换色谱法(IEC),使用的仪器是Agilent 1260(安捷伦1260),用IEC法检测单克隆抗体的电荷异质性可以自己独立的处理样品,编序列,积分和看色谱图等等。

毛细管等电聚焦电泳法(CIEF)使用的仪器是Agilent 7100,现在还在学习使用该仪器。

5. 难点与创新点

1. 用IEC和CIEF法对同一种单克隆抗体进行分析研究,可以更为直观的比较出两种方法的优劣之处;2. 使用的实验仪器比较先进,使得研究得到的数据更加具有说服力;3. 检测单克隆抗体的方法和手段更加科学有效,提高了实验的准确性和完整性。

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