萎缩芽孢杆菌NX-12抗菌物质的分离纯化与鉴定开题报告

 2023-06-29 13:07:29

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

文 献 综 述引言萎缩芽孢杆菌NX-12是一株能够对植物致病真菌具有广谱抑菌活性的生防细菌,微生物丰富多样的次级代谢产物一直都是天然抗真菌剂的重要来源,但现有的筛选手段及分离纯化方法并不足以应付现有物质的分离需要。

首先分离纯化前无法预估活性物质的结构,应用活性追踪法可能拿到的是已有报道的化合物;其次,难以实现高通量筛选,由于活性化合物产量较低,需要大量的发酵液,否则没有足够的化合物用于活性的检测;现有技术手段的局限性,同一种技术手段功能的单一性决定了要进行多次实验才有可能筛选到合适的且不改变物质结构的分离手段。

目前,微生物产生的抗真菌活性物质的分离纯化主要依靠柱层析和制备液相色谱(Preparative HPLC)法分离得到纯品。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

1、研究问题以萎缩芽孢杆菌NX-12作为研究对象,以黄瓜尖孢镰刀菌为指示菌株,对萎缩芽孢杆菌NX-12发酵后抑菌物质粗提物进行活性验证,探究其对黄瓜尖孢镰刀菌的亚结构的影响及其拮抗情况。

同时对其抗真菌物质进行初步分离与纯化,结合红外光谱与核磁共振等技术对纯化后的物质进一步鉴定。

2、研究手段2.1 材料2.1.1 供试菌株 萎缩芽孢杆菌(Bacillus atro-phaeus)NX-12和黄瓜尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)2.1.2 培养基PDA培养基:去皮马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂粉15g,蒸馏水1L,pH7.0;LB液体培养基:胰蛋白胨10g,酵母粉5g,NaCl10g,蒸馏水1L,pH7.0;LB固体培养基:胰蛋白胨10g,酵母粉5g,NaCl10g,琼脂20g,蒸馏水1L,pH7.0;发酵培养基:Landy培养基(g/L):葡萄糖20g, L-谷氨酸5g,KH2PO4 1g,MgSO47H2O 0.5g,KCl 0.5g,酵母粉1g,L-苯丙氨酸210-3,MnSO4 510-3 , CuSO45H2O 0.1610-3, FeSO47H2O 0.15 10 -3。

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