1. 研究目的与意义
内容:用非还原型SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法和根据待测组分分子大小进行分离的分子排阻色谱法来检测重组人白介素-2(125Ser)原液纯度。
意义:利用非还原型SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法和分子排阻色谱法来检测重组人白介素-2原液纯度,对于企业生产质量控制有重大的意义。
2. 文献综述
重组人白介素-2(125Ser)原液纯度检测方法马宗艳摘 要:用非还原型SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法和根据待测组分分子大小进行分离的分子排阻色谱法来检测重组人白介素-2 (125Ser)原液纯度。
关键词:电泳法;分子排阻色谱法;重组人白介素-2(125Ser);纯度检查 重组人白介素-2(125 Ser)工程菌株系由带有人白介素-2(125 Ser)基因的重组质粒转化的大肠杆菌菌株,其中人白介素-2基因序列中原125位编码半膀氨酸的序列被突变为编码丝氨酸的序列[1]。
白介素-2 ( Interleukin-2,IL-2)是在研究T细胞长时间生长的条件过程中被发现的。
3. 设计方案和技术路线
1.电泳法1.1检验用溶液的制备1.2供试品溶液的制备1.3制备分离胶溶液1.4制备浓缩胶溶液1.5加样1.6电泳1.7固定与染色1.8结果分析与判定2.分子排阻色谱法2.1配制流动相2.2平衡色谱柱2.3进样2.4冲洗色谱柱2.5结果判定
4. 工作计划
第一阶段:2022年3月中旬:查阅文献综述,确定课题思路,制定实验方案;第二阶段:2022年4月上旬:初步试验、实验条件选择;第三阶段:2022年4月至5月:进行实验研究;第四阶段:2022年5月至6月:整理分析实验数据,撰写论文。
5. 难点与创新点
非还原型SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法化学性能稳定、对PH和温度变化比较稳定、几乎无吸附和电渗作用以及分辨率高等优点。
而分子排阻色谱法则具有操作简便,灵敏度高,重现性好的特点,两者都可以很好的检测重组人白介素-2原液的纯度,对于企业生产质量控制有重要的意义。
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