1. 研究目的与意义
研究内容：人乳寡糖是人乳中含量第三的重要成分，随着糖生物学研究的不断深入，人乳寡糖被报道具有平衡肠道菌群，阻碍病毒黏附，促进婴幼儿神经系统发育等功能。
人乳样品经两次膜过滤除脂质和蛋白之后，使用二维制备液相色谱方法对人乳寡糖进行精细的纯化制备。
实验采用高效液相色谱法以石墨化碳材料分析和制备寡糖异构体，单体样品均经过液相色谱进行纯度验证并用四极杆-飞行时间质谱仪进行结构表征。
2. 文献综述
人乳寡糖的研究综述摘 要：人乳作为新生儿唯一的天然营养来源，在为婴幼儿提供必需营养物质的同时，也在完善其免疫系统、促进生长发育等方面发挥重要作用.人乳寡糖因其含量丰富、功能多样，受到了科研工作者们的广泛关注；随着糖结构及生物医学研究手段的发展，使得研究者认识到在防御病毒入侵，婴幼儿肠道菌群建立中的特殊作用，进而成为国际前沿热门领域。
人乳寡糖分离分析是寡糖基础研究中持续关注的问题，本研究针对寡糖组成复杂多样、异构体多的特点，选择合适的液相色谱材料开展系统的寡糖单体分离制备，将制备得到的单体经高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱进行纯度验证和结构表征。
关键词：人乳寡糖；分离；结构；表征A Review of Research on Human milk oligosaccharidesAbstract:As the only natural nutrient source for newborns, human milk plays an important role in improving the immune system and promoting growth and development while providing essential nutrients for infant. Human milk oligosaccharides (HMOs) have attracted attention form researchers because of their abundant content and diverse functions. The development of carbohydrate and biomedical research technology has enables researchers to recognize the indispensable of prevent viral invasion and establishment of healthy intestinal flora in infants. HMOs become a hot pot in the international frontier. Separation and analysis of human milk oligosaccharides is a persistent concern in the basic research, in this study, the characteristics liquid chromatography materials of separate oligosaccharides were selected to handle this complicated samples, the prepared oligosaccharide monomers were subjected to high performance liquid chromatography-quadrupole time-of flight mass spectrometry for verified purity and identified structures.Key Words:Human milk oligosaccharides;Separation;structure;Characterization引言寡糖（oligosaccharide），又叫低聚糖，是指由3至10个甚至更多的单糖通过糖苷键连接起来，形成直链或分枝链的一类低聚碳水化合物，它们广泛的存在于自然界中，包括动物的乳汁在内。
3. 设计方案和技术路线
研究方案：1.采用高效液相色谱优化最佳的单体制备条件2.放大分析条件进行液相制备及后处理3.制备得到的寡糖单体经液相色谱-质谱联用，进行纯度验证和结构表征。
技术路线：人乳样品经过亲水色谱得到不同聚合度的寡糖，再经液相石墨化碳材料得到寡糖单体。
自制的单体通过高效液相色谱及质谱进行纯度验证、结构表征，最后通过质谱规律解析，判断得到的物质是否为目标组分。
4. 工作计划
第一阶段：2022年1月至3月：文献研究、综述撰写、实验方案设计；第二阶段：2022年4月至5月：理清思路、开展实验、着手制备并对得到的单体进行结构表征；第三阶段：2022年5月至6月：整理数据、补充实验、撰写论文。
5. 难点与创新点
本课题通过采用石墨化碳高效液相色谱对自制的人乳寡糖进行异构体分离和单体制备，再结合高效液相以及四极杆-飞行时间质谱，对制备得到的单体进行结构表征，不仅能够完善人乳寡糖的分离制备及结构表征方法，同时也为更多低含量、高聚合度的寡糖新结构的发现提供依据。
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