1. 研究目的与意义
中药及其复方药效物质基础研究是中药现代化的重点和难点。
中药多以汤剂形式(水提液)口服用药,汤剂中含有若干种化学成分,但只有通过吸收过程进入体内的化学成分才可能是药效的真正来源。
脂质体是一种类似细胞膜的双分子层囊泡,是一种重要的药物载体,也是一种常用的生物膜模型。
2. 文献综述
中药活性成分筛选的研究进展摘要:本文总结概括了目前中药活性成分筛选技术的进展情况,对细胞膜色谱的研究现状进行了着重分析,并简略介绍了基因芯片技术和计算机辅助虚拟筛选技术,最后对中药活性成分筛选技术做了总结与展望。
关键词:中药;筛选;活性成分;靶分子;生物色谱;细胞膜色谱;芯片目前大部分中药临床药效虽已得到肯定,但由于中药及其复方具有多成分、多途径、多靶点协同作用的特点,使得中药药效物质基础不明确,作用机制不清楚,缺乏科学、合理、有效的药效和安全性评价体系,在很大程度上限制了我国中医药的现代化和国际化的进程。
因此,了解中药作用机理,认识复方的作用,筛选出活性成分是至关重要的。
3. 设计方案和技术路线
1、制备当归、川芎中药水提液,建立高效液相色谱法测定中药水提液中阿魏酸的含量的方法并进行测定。
2、醋酸钙脂质体液膜萃取技术的构建:首先制备空白脂质体,经醋酸钙溶液水化洗脱后在外水相硫酸钠中透析使膜内外形成特定的梯度然后载入药物,再上葡聚糖凝胶柱分离,最后破膜进液相。
3、选取含弱酸性成分的药材两种(当归、川芎),以药材中所含的已知活性成分(阿魏酸)为考察指标,探讨脂质体种类(普通脂质体和醋酸钙脂质体)、透析时间、磷脂胆固醇用量比、水提液上样量、药材浓度和萃取温度及时间对萃取率的影响。
4. 工作计划
2022-1至2022-2进行相关文献的查阅,确定实验研究方案和技术路线,熟悉实验室环境,上手各类基本操作。
2022-3至2022-4完成标准曲线、精密度、回收率等方法学实验。
运用单因素考察的方法确定透析时间、磷脂胆固醇用量比、水提液上样量、药材浓度和萃取温度、萃取时间等具体工艺条件。
5. 难点与创新点
提出醋酸钙脂质体液膜萃取的概念并建立可用于中药复方活性成分筛选的醋酸钙脂质体液膜萃取技术,该技术可在体外将中药水提液中的具有生物膜通透性的组分分离出来,做为中药酸性成分筛选的对象,与经典理化分离法、血清化学法和生物色谱分离法相比,具有针对性强、快速、低成本和高效率等特点。
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