1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1.本课题意义:畜禽养殖业作为农业的重要组成部分,其粪便污染已成为世界普遍关注的焦点。
现今,中国畜牧养殖已对中国生态环境安全构成严重威胁。
中国第一次全国污染普查资料显示,农业生产的氮排放量占总氮排放量的50%以上,农业污染已成为影响中国水环境安全的首要因素。
2. 研究的基本内容和问题
1.研究目标:总目标为实验把山羊作为研究对象,在动物整体,上皮组织等不同层次上系统性研究瘤胃代谢产物促进瘤胃上皮对能量物质的吸收和尿素转运的机理,研究同步提高能量和氮利用效率的作用并提出促进山羊生长,减少氮污染的有效措施。
可以从以下几个方面对实验目标进行划分①整体动物研究目标:通过日粮NFC调节瘤胃生物代谢,引起PH变化,继而提高瘤胃上皮对能量物质SCFA的吸收;增强血浆尿素氮跨上皮进入瘤胃转运率;提高瘤胃上皮对氨的吸收,促进尿素氮的循环;增强瘤胃微生物对尿素氮的利用;提高进入小肠微生物蛋白浓度;提高山羊生长速度,减少尿氮排出;提高GPR4,UT-B,两种氨载体,和五种SCFA载体表达水平;解析瘤胃PH通过GPR4调节SCFA吸收的作用。
②组织水平目标:体外研究揭示不同PH对瘤胃上皮SCFA吸收的调节,并研究不同PH对瘤胃上皮尿素转运的调节;阐述PH调节的规律;验证整体动物实验获得的相关结果。
3. 研究的方法与方案
1.研究方法:本研究方案中的动物饲喂,样品采集与生化分析,瘤胃上皮总RNA和总蛋白提取,qPCR,日粮粗精比的选择分别采用以下方法:瘤胃上皮组织分别用qPCR,测定;用脲酶法测定尿液,血浆中尿素氮量。
2.技术路线(图)见附件3.实验方案:①整体动物研究方案:选择12只健康(两年完成),3月龄波杂山羊,称量初始体重,随机分为2组,每组各6头。
根据美国NRC推荐的生长山羊饲养标准分别饲喂各组含不同粗精比例的日粮。
4. 研究创新点
①首次将瘤胃上皮载体介导SCFA吸收、氨吸收和血浆尿素的转运作为促进生长,低碳饲喂和减少污染的关键环节。
②通过日粮调节瘤胃微生物代谢,将提高内,源尿素氮利用效率与物质能量合理利用相结合
5. 研究计划与进展
①2016.9-2016.12 进行整体动物实验,包括动物购买,饲养屠宰,样品收集②2017.32017.5各项实验数据测定
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