1. 研究目的与意义
内容:1、通过MAB(单克隆抗体)菌体的包涵体,介绍本实验的蛋白纯化工艺。
2、本实验主要研究过程:包涵体→洗涤→变性→脱盐→DEAE反穿→Q反穿→透析复性。
3、列出每一步所需的仪器与型号、试剂厂家等实验条件,并附上实验结果(电泳图)以供比较。
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2. 文献综述
MAB纯化工艺研究[摘要]单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具,其在基因和蛋白质的结构与功能研究方面有着不可或缺的作用,在人类和动植物的免疫学诊断方面至今仍有着无可代替的重要作用。
本文综述了单克隆抗体的制备技术,包括嵌合抗体、噬菌体展示技术、核糖体展示技术、基因工程抗体等,及其在临床医学和疾病的诊断与治疗等领域的广阔应用前景。
[关键词]单克隆抗体 反穿 制备技术1975年,Kohle:和Milstein创立了杂交瘤技术制备单克隆抗体,此后单克隆抗体迅速广泛地应用于生物学和医学的各个领域。
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3. 设计方案和技术路线
包涵体↓包涵体洗涤↓包涵体变性↓G25脱盐(5.050cm,1000ml)↓DEAE反穿(1.620cm, 40ml)↓Q反穿(1.620cm, 40ml)↓透析复性
4. 工作计划
2022年1月12-3月4号:查阅MAB相关资料准备开题报告2022年3月9-4月30号:进行课题的相关实验2022年3月9号-4月30号:做课题的实验2022年5月1-7号:整理分析相关实验数据2022年5月8-31号:撰写论文
5. 难点与创新点
通过实验控制菌种、Urea、pH条件、蛋量以及加入不同浓度Tween80等变量因素,得到的目的蛋白更纯,洗脱的杂蛋白更多。
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