何首乌主要活性成分二苯乙烯苷对脂多糖诱导的巨噬细胞极化的作用研究开题报告

 2022-12-26 11:12

1. 研究目的与意义

1.内容 本课题拟通过二苯乙烯苷(TSG)对巨噬细胞极化的影响,观察TSG是否可以抑制巨噬细胞向炎性表型的转化从而改善AS进程。

课题利用体外细胞实验,以脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞诱导M1型极化,观察用二苯乙烯苷处理后细胞形态的改变。

流式细胞术检测细胞膜表面M1/M2型巨噬细胞特征型分子CD80、CD86、CD206、CD163的表达水平。

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2. 文献综述

巨噬细胞极化及相关机制研究进展南京中医药大学 蔡雅洁摘要 巨噬细胞是生物体中宿主防御的重要调节者。

为了满足机体不同的需要,巨噬细胞可以在不同刺激因子下转化为具有不同功能表型的状态,这个过程称为极化。

不同影响因素下的静息巨噬细胞(M0)可极化形成不同的表型,促炎表型(M1)和抗炎表型(M2)。

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3. 设计方案和技术路线

实验方法1.药物作用浓度确定MTT法摸索TSG作用于巨噬细胞的最佳浓度(无细胞毒浓度)。

2.炎性巨噬细胞模型构建采用LPS诱导小鼠源Raw264.7巨噬细胞系向炎症型的M1型极化。

3.细胞特征性表面分子表达水平细胞经LPS诱导并给以药物处理后,以流式细胞术检测细胞表面M1/M2型巨噬细胞特征性表面分子的表达水平,确定TSG对于巨噬细胞表型的影响。

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4. 工作计划

第一阶段:2022.01-02 撰写文献综述,制定实验方案;第二阶段:2022.03-04 初步试验,选择实验条件;第三阶段:2022.04-05进行实验;第四阶段:2022.06 整理数据,撰写论文。

5. 难点与创新点

二苯乙烯苷对AS的保护作用已有大量报道证实,其可通过抑制内皮功能障碍、抗氧化、抗炎、抗血小板聚集等机制防治AS。

巨噬细胞在AS的发生发展中起到重要作用,巨噬细胞在不同条件下可以极化为M1和M2型,其中M2型的巨噬细胞具有炎症抑制作用,对AS产生积极作用。

而二苯乙烯苷影响巨噬细胞极化的研究报道尚不多见,在本研究中,我们试图观察二苯乙烯苷是否可以抑制巨噬细胞向炎性表型的转化。

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