体外消化蚕蛹蛋白对小鼠脾淋巴细胞转化的影响开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

体外消化蚕蛹蛋白对小鼠脾淋巴细胞转化的影响

蚕蛹是蚕丝业的主要副产物，不仅来源丰富，而且具有较高的营养价值。中医认为蚕蛹性温味咸，有补肾、强精、壮阳的功效。李时珍在 《本草纲目》 中指出：蚕蛹味成辛、性平、无毒，人食可强身健身，入药可医多病，能补气养血、强腰壮肾、滋肺润肠。现代医学也指出蚕蛹体内含有人体所需的18 种分类氨基酸、多糖、微量元素等，在医药、保健及美容等方面具有较高的利用价值。特别是近年的大量研究发现，蚕蛹蛋白在免疫、抗肿瘤等方面具有广泛的生理活^[1-3]。

脾是重要的淋巴器官，有造血、滤血、清除衰老血细胞及参与免疫反应等功能^[4] 。体外培养脾细胞具有在体内脾细胞结构和功能上的某些特点，不受神经、体液因素的调节，可利用此模型方法直接观察各种外源性因素对脾细胞的生物学作用。体外脾细胞模型已广泛应用于病理生理、药理及毒理学等方面的研究^[5-6]。

体外培养脾细胞经过诱导可产生多种免疫相关细胞因子，本实验选取白细胞介素1α（IL-1α），白细胞介素1β（IL-1β）作为特征性细胞因子来反映蚕蛹蛋白对小鼠脾细胞免疫作用的影响。白细胞介素-1家族有11个成员，其中绝大多数是促炎性细胞因子，主要通过刺激炎症和自身免疫病相关基因的表达，诱导环氧化酶2、磷脂酶A2、一氧化氮合酶、干扰素γ、黏附分子等效应蛋白的表达，在免疫调节及炎症进程中扮演着重要的角色；多数经典家族成员的受体、信号传导和功能已经得到了广泛而深入的研究。

2. 研究的基本内容和问题

1.研究目标

成功提取蚕蛹蛋白，成功体外培养小鼠脾细胞并诱导其分泌出IL-1α，IL-1β，用放射性免疫检测出IL-1α，IL-1β泌变化，并有效分析实验结果，为蚕蛹蛋白在动物饲料和动物药品方面的应用提供实践依据。

2.研究内容

3. 研究的方法与方案

1.研究方法

本研究将蚕蛹脱脂冻干后的蛋白粉作为营养物质添加到小鼠脾细胞体外培养的培养液中，并合理设置浓度梯度，采用放射性免疫检测技术检测细胞上清中细胞因子白细胞介素1α（IL-1α），白细胞介素1β（IL-1β）的分泌情况，并对所得结果进行分析总结，以期得到蚕蛹蛋白对小鼠免疫功能的作用。

2.技术路线

4. 研究创新点

本课题立足于蚕蛹蛋白对动物免疫功能的影响开展研究，为蚕蛹蛋白在动物饲料和动物药品方面的应用提供实践依据。

现有研究表明，蚕蛹蛋白有较高的营养价值和生物保健功能，如补血作用，提供营养物质能力，提高机体免疫器官功能，对细菌、病毒及肿瘤细胞均有选择性杀伤作用、抗氧化作等。试验表明，蚕蛹中的复合氨基酸具有补血作用和提供营养物质能力，还可提高机体免疫器官功能，在治疗恶性肿瘤方面前景甚好。

脾是重要的淋巴器官，有造血、滤血、清除衰老血细胞及参与免疫反应等功能体外培养脾细胞具有在体内脾细胞结构和功能上的某些特点，不受神经、体液因素的调节，可利用此模型方法直接观察各种外源性因素对脾细胞的生物学作用。

5. 研究计划与进展

2016年9月--2016年10月：蚕蛹蛋白的提取及体内消化过程的模拟；

2016年10月--2016年11月：小鼠脾细胞的体外培养；

2016年11月--2016年12月：诱导小鼠脾细胞分泌白细胞介素；

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