一粒小麦脆性突变体的表型鉴定及重组体筛选开题报告

 2023-02-10 16:12:41

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

植物细胞壁是植物细胞区别于动物细胞的一重要组织,对植物起支持和保护作用。

典型的细胞壁由初生壁、胞间层和次生壁三部分组成。

细胞壁的主要成分是木质纤维素类物质,主要是由纤维素、半纤维素和木质素组成,此外还包括少量果胶、蛋白质、酚类和脂肪酸等生物大分子聚合而成的复杂网络结构(薛晶晶,2012)。

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2. 研究的基本内容和问题

(一)研究目标1、筛选脆性基因的重组体,缩小标记间的遗传距离。

2、鉴定重组体的表型以期进一步精细定位脆性基因,为后续的图位克隆该基因打基础。

(二)研究内容1、构建4000单株的突变基因次级F2群体。

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3. 研究的方法与方案

(一)研究方法1、小麦基因组DNA的提取植物基因组DNA的提取采用SDS法,将植物材料在液氮中研磨后加入适量的DNA提取液(0.1MTrispHS.O,0.05 MEDTAPH8.0,1.25%SDS,0.5MNaCI,3.89/1NaBisufite)。

65℃处理15min,用氯仿/异戊醇(24:1)抽提,加预冷(一20℃)酒精沉淀,用70%酒精洗涤,加适量TE溶解,4℃或-20℃贮藏待用。

2、PCR的扩增PCR反应体系为12.5 l,含10 ng模板DNA,0.2 mM dNTP,1.5 mM MgCl2,0.2 mM引物,1PCR buffer(10 mM pH8.3 Tris-HCl,50 mM KCl),0.1 U Taq聚合酶。

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4. 研究创新点

脆性突变体在小麦中鲜有报导,小麦中控制机械强度的基因的机制还没有完整的报导。

植株的机械强度与作物的产量息息相关,因此定位并克隆小麦机械强度相关的基因显得尤为重要。

一粒小麦的基因组较普通小麦倍性小,克隆基因相对容易。

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5. 研究计划与进展

2014年7月~2014年9月 查阅相关文献,学习相关知识;熟悉基本操作,包括:PCR的扩增,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染、拍照等。

2014年10月~2015年3月 对次级F2群体进行重组体的筛选,精细定位栽培一粒小麦脆性基因。

2015年3月~2015年5月 处理数据、整理论文。

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